一、無(wú)菌操作技術(shù)

1、定義　

是指在執(zhí)行實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，防止一切微生物侵入機(jī)體和保持無(wú)菌物品及無(wú)菌區(qū)域不被污染的操作技術(shù)和管理方法；

無(wú)菌操作技術(shù)是微生物實(shí)驗(yàn)的基本技術(shù)，是保證微生物實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確和順利完成的重要環(huán)節(jié)。

2、內(nèi)容

無(wú)菌操作技術(shù)主要包括兩方面：

1）創(chuàng)造無(wú)菌的培養(yǎng)環(huán)境。包括提供密閉的培養(yǎng)容器、培養(yǎng)容器的滅菌、培養(yǎng)基的滅菌等；

2）在操作和培養(yǎng)過(guò)程中防止一切其它微生物的侵入的措施。包括紫外線(xiàn)殺菌、甲醛熏蒸、超凈臺(tái)的消毒與檢測(cè)、操作工具、器皿滅菌、操作方法等。

3、無(wú)菌操作原則

1）在執(zhí)行無(wú)菌操作時(shí)，必須明確物品的無(wú)菌區(qū)和非無(wú)菌區(qū)，接種時(shí)必須穿工作服、戴工作帽應(yīng)在進(jìn)無(wú)菌室前用肥皂洗手，然后用75%酒精棉球?qū)⑹植粮蓛簦?/span>

2）在操作前20～30分鐘要先啟動(dòng)超凈臺(tái)和紫外燈，進(jìn)行接種所用的吸管、平皿及培養(yǎng)基等必須經(jīng)消毒滅菌，打開(kāi)包裝未使用完的器皿，不能放置后再使用，金屬用具應(yīng)高壓滅菌或用95%酒精點(diǎn)燃燒灼3次后使用。嚴(yán)禁用手直接拿無(wú)菌物品，如瓶塞等，而必須用消毒的鉗、鑷子等；

3）從包裝中取出吸管時(shí)，吸管尖部不能觸及外露部位，使用吸管接種于試管或平皿時(shí)，吸管尖不能觸及試管或平皿邊；

4）接種樣品、轉(zhuǎn)種細(xì)菌必須在酒精燈前操作，接種細(xì)菌或樣品時(shí)，吸管從包裝中取出后及打開(kāi)試管塞都要通過(guò)火焰消毒；

5）接種環(huán)或接種針在接種細(xì)菌前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼全部金屬絲，必須時(shí)還要燒到環(huán)和針與桿的連接處；

6）吸管吸取菌液或樣品時(shí)，應(yīng)用相應(yīng)的橡皮頭吸取，不得直接用口吸。傾倒平板應(yīng)在超凈臺(tái)內(nèi)操作，并且在開(kāi)啟和加蓋瓶塞時(shí)需反復(fù)用酒精燈燒。