小荡货h秘书h,久久无码人妻一区二区三区,gogo西西人体做爰大胆视频图,极品成人

VIP標識 上網做生意,首選VIP會員| 設為首頁| 加入桌面| | 手機版| RSS訂閱
食品伙伴網服務號
 

組織DNA的制備

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-07-05
  (1)將200mg組織在冰浴條件下用消毒剪刀充分剪碎,加4ml 1×RSB緩沖液(10mmol/L Tris, pH7.4;10mmol/l NaCl;25mmol/L EDTA,pH7.4)放入10ml帶蓋的塑料管中。
  (2)加SDS至濃度為1%(可加0.4ml10%SDS),混勻。由于DNA從核中釋放出來,樣品變得粘稠。
  (3)加10mg/ml蛋白酶k 44μl,終濃度為100μl/ml,37℃保溫1~3d,直到組織完全解體。中間可振動樣品管幾次。加0.4ml 5mol/L NaCl。
  (4)用等體積飽和酚、1/2體積飽和酚和1/2體積氯仿-異戊醇及等體積氯仿-異戊醇(24:1)各抽提一次,3000rpm離心5min,用大口鈍緣吸管小心吸取上層水相。
  (5)加2.5倍體積預冷無水乙醇沉淀DNA。用一玻璃棒收集白色纖維絲狀的大片段DNA,并移入一新管,吸干DNA中的無水乙醇。
  (6)DNA溶于4ml 0.1×SSC中,4℃過夜可作進一步純化。
  (7)加20μl RNase A(10mg/ml),37 ℃保溫5h。加0.4ml 5mol/L NaCl。
  (8)同上法用飽和酚、氯仿-異戊醇抽提,乙醇沉淀離心,棄上清。
  (9)75%乙醇洗滌2次,離心,棄上清,真空抽干。適量1×TE溶解,保存在4℃。
 
[ 網刊訂閱 ]  [ 食品專題搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關閉窗口 ] [ 返回頂部 ]

 

 
推薦圖文
推薦食品專題
點擊排行
 
 
Processed in 0.200 second(s), 90 queries, Memory 1.07 M
主站蜘蛛池模板: 屯昌县| 衡阳县| 谢通门县| 嘉鱼县| 云龙县| 木里| 昌宁县| 随州市| 巴林右旗| 阿克陶县| 奉贤区| 汉源县| 贡山| 宁德市| 新兴县| 阿克陶县| 五原县| 繁昌县| 遂宁市| 米林县| 玛纳斯县| 伊宁县| 黄骅市| 张家港市| 三门县| 永康市| 林口县| 鄂托克旗| 砀山县| 鹤岗市| 大宁县| 府谷县| 淮北市| 海兴县| 沅陵县| 龙南县| 四平市| 望都县| 龙里县| 依兰县| 岐山县|