小荡货h秘书h,久久无码人妻一区二区三区,gogo西西人体做爰大胆视频图,极品成人

VIP標識 上網做生意,首選VIP會員| 設為首頁| 加入桌面| | 手機版| RSS訂閱
食品伙伴網服務號
 
當前位置: 首頁 » 食品專題 » 生物實驗技術 » 植物學技術 » 正文

植物病毒RNA提取

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-07-08
大多植物病毒RNA為單鏈RNA,并且其極性與mRNA極性相同,植物病毒RNA提取較為簡單,一般使用酚氯仿即可獲得滿意結果。
  一、材料
  提純TMV病毒液(10mg/ml)。
  二、設備
  冷凍臺式離心機,低溫真空干燥儀,電泳儀,電泳槽。
  三、試劑
  TE-飽和酚:氯仿(1:1),氯仿,3M NaAc(pH5.2),乙醇(100%和70%),TE緩沖液,無RNA酶的雙菌水。
  四、操作步驟
  1、取一eppendorf管加入提純TMV(10mg/ml)400ml,再加入等體積酚/氯仿,蓋緊管蓋后用手充分振蕩1分鐘,4℃下12000g離心10分鐘。
  2、吸取水相于一新eppendorf管,再用酚/氯仿抽提,直至水相和有機相交界面無蛋白為止。
  3、吸取水相于新eppendorf心管,加入等體積氯仿,用手倒置離心管數十秒,4℃下12000g離心10分鐘。
  4、取水相,加入1/10倍體積的3mol/L NaAc(pH5.2),2.5倍體積的冰冷乙醇,混勻,-20℃30分鐘。
  5、4℃下12000g離心15分鐘,小心棄去上清液,用70%乙醇洗滌沉淀,4℃下12000g離心5分鐘。
  6、小心棄去上清液,沉淀真空干燥5分鐘或空氣干燥10分鐘,并溶于無RNA酶的雙菌水或TE緩沖液中。
  7、取10ml進行電泳分析,另10ml用于cDNA合成。
  [注意] 1、整個操作應盡可能在低溫下進行。
  2、由于病毒RNA鑲嵌于外殼蛋白里面,因此要充分剝去病毒外殼蛋白,一般需要多次進行酚/氯仿的抽提。
 
[ 網刊訂閱 ]  [ 食品專題搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關閉窗口 ] [ 返回頂部 ]

 

 
推薦圖文
推薦食品專題
點擊排行
 
 
Processed in 0.905 second(s), 1057 queries, Memory 3.12 M
主站蜘蛛池模板: 黎城县| 昌都县| 扶绥县| 永福县| 上虞市| 普宁市| 北票市| 秭归县| 多伦县| 分宜县| 平凉市| 辰溪县| 哈巴河县| 永昌县| 洪洞县| 新余市| 临澧县| 安福县| 会同县| 六安市| 安仁县| 昆山市| 旌德县| 东乡| 潞城市| 珲春市| 綦江县| 美姑县| 类乌齐县| 观塘区| 旬邑县| 资阳市| 高要市| 龙口市| 鄂伦春自治旗| 五原县| 新源县| 香格里拉县| 体育| 那曲县| 天长市|